非变性聚丙烯酰胺凝胶SDS与变性凝胶的区别

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非变性聚丙烯酰胺凝胶SDS与变性凝胶的区别
变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)是根据寡核苷酸的大小来分离,可将全长产物与不完整的短分子分开。变性后的片段所带电荷相对一致,其泳动速度只由分子量决定。
非变性凝胶里面没加变性剂,一般是SDS。非变性胶跑出来的蛋白能保持其活性一般用做功能试验,如EMSA。由于没有变性剂的原因非变性胶电泳时除了与蛋白分子量有关也会受都电荷的影响,因此对蛋白等电点的确定和缓冲液的酸碱性有注意,有时需要倒转电泳时的正负极。从跑的胶来看,变性胶会比较好看,带比较窄,非变性胶跑出来则比较粗糙。
而在非变性凝胶中分离中取决于它所带的电荷和分子量的大小两个因素。所以变性凝胶分辨率更高。
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